Imunita

Metody diagnostiky syfilis

Pro laboratorní diagnostiku syfilis se používají přímé i nepřímé metody. Přímé diagnostické metody identifikují samotný patogen nebo jeho genetický materiál, což je absolutním důkazem přítomnosti onemocnění.

Přímé metody se používají k diagnostice časných forem onemocnění (primární a sekundární syfilis) s klinickými projevy (erozivní a ulcerózní elementy), k potvrzení vrozené syfilis (tkáň pupečníku, placenta, orgány plodu, výtok z nosní sliznice, obsah puchýřů , výtok z povrchu papulí) .

Nepřímé metody diagnostiky syfilis jsou testy, které zjišťují protilátky proti původci syfilis v krevním séru a mozkomíšním moku, dále se používá termín sérologické laboratorní testy.

Hlavními metodami diagnostiky syfilis jsou stanovení protilátek proti Treponema pallidum pomocí sérologických výzkumných metod – netreponemových a treponemových [2 – 6].

— K vyšetření pacientů s podezřením na syfilis se doporučuje použít následující netreponemální testy:

— Stanovení protilátek proti Treponema pallidum v netreponemálních testech (RPR, RMP) (kvalitativní a semikvantitativní studie) v krevním séru/cerebrospinálním moku;

— Venereal Disease Research Laboratory Test (VDRL) [3–6, 22].

Síla doporučení je C (úroveň důkazu 5)

Komentář: Obecná charakteristika netreponemových testů: používá se antigen netreponemového původu (standardizovaný kardiolipinový antigen); pozitivní 1–2 týdny po vzniku primárního syfilomu; mají nízkou citlivost (až 70–90 % u časných forem syfilis a až 30 % u pozdních forem) a mohou poskytovat falešně pozitivní výsledky (3 % nebo více).

Výhody netreponemových testů: nízká cena; technická jednoduchost provedení; rychlost získávání výsledků.

Nevýhody netreponemových testů: nízká senzitivita u primární (75–80 %) a pozdní syfilis (30–75 %), možnost falešně pozitivních výsledků (až 7 %).

— Pro vyšetření pacientů s podezřením na syfilis se v závislosti na klinické situaci doporučuje použít následující treponemální testy:

— Stanovení protilátek proti Treponema pallidum při pasivní hemaglutinační reakci (PHA);

— Stanovení protilátek proti Treponema pallidum pomocí enzymové imunoanalýzy (ELISA);

— Stanovení protilátek proti Treponema pallidum imunoblotováním;

— Stanovení protilátek proti Treponema pallidum v krevním séru/mozkomíšním moku imunofluorescenční reakcí (IF), včetně modifikací IFab a IF₂₀₀);

— Imobilizační reakce (bledých) treponem (RIBT, RIT);

Síla doporučení je C (úroveň důkazu 5)

Komentář: Obecná charakteristika treponemových testů: používá se antigen treponemového původu; citlivost – 70 – 100% (v závislosti na typu testu a stádiu syfilis); specificita – 94 – 100 %.

Stručný popis metod:

1. Stanovení protilátek proti Treponema pallidum při pasivní hemaglutinační reakci (PHA) je vysoce citlivý a specifický test. Senzitivita metody pro primární syfilis je 76%, pro sekundární syfilis – 100%, pro latentní syfilis – 94-97%, specificita – 98-100%.

2. Stanovení protilátek proti Treponema pallidum metodou ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) je vysoce citlivý a specifický test. Senzitivita na primární a sekundární syfilis je 98–100 %, specificita 96–100 %. Umožňuje diferencované a celkové stanovení IgM a IgG protilátek proti původci syfilis.

3. Stanovení protilátek proti Treponema pallidum metodou imunoblotování je modifikací ELISA. Senzitivita a specificita je 98–100 %. Může být použit k potvrzení diagnózy, zejména pokud jsou výsledky jiných treponemálních testů sporné nebo protichůdné. Umožňuje diferencované a celkové stanovení IgM a IgG protilátek proti původci syfilis.

Přečtěte si více

Jak se provádí stěr na chlamydie a co ukazuje?

4. Stanovení protilátek proti Treponema pallidum imunofluorescenční reakcí (IF), včetně modifikací IFab a IF₂₀₀) je test, který je poměrně citlivý ve všech fázích syfilis. Senzitivita pro primární syfilis je 70-100%, pro sekundární a pozdní syfilis – 96-100%), specificita – 94-100%. RIF se používá k odlišení latentních forem syfilis a falešně pozitivních výsledků testů na syfilis.

5. Imobilizační reakce (bledých) treponemů (RIBT, RIT) je klasický test pro průkaz specifických protilátek proti treponemu; citlivost (celková pro stadia syfilis) je 87,7 %; specifičnost – 100 %. Test náročný na práci a obtížné nastavení, který vyžaduje značné zdroje k provádění testování. Rozsah aplikace RIBT se zužuje, ale zachovává si pozici „reakčního arbitra“ v diferenciální diagnostice latentních forem syfilis s falešně pozitivními výsledky sérologických reakcí.

6. Imunochemiluminiscenční metoda má vysokou senzitivitu a specificitu (98–100 %), umožňuje kvantitativně stanovit hladinu protilátek proti původci syfilis, lze ji použít k potvrzení syfilitické infekce a screeningu.

7. Metoda imunochromatografie má senzitivitu 99–100 % a specificitu 97–99,5 %. Jednoduchý technologický postup pro provedení a interpretaci výsledku a absence nutnosti složitého vybavení umožňují použití této metody jako doplňkové zkoušky.

RIF, ELISA a imunoblotting jsou pozitivní přibližně 3 týdny po infekci a dříve, RPGA – 4 týdny, RIBT – 7-8 týdnů.

Výhody treponemových testů: vysoká senzitivita a specificita.

Nevýhody treponemových testů: nelze je použít ke sledování účinnosti terapie a příležitostně mohou poskytnout falešně pozitivní výsledek.

V závislosti na cílech se sérologické testování populace na syfilis provádí různými metodami.