Diagnostické metody pro infekci HIV

Pro screening se používá metoda ELISA. Imunoblot se používá k potvrzení diagnózy. Více podrobností níže.

V některých situacích se k detekci HIV používá kvalitativní (tj. existuje nebo není, bez odpovědi na otázku „kolik?“) PCR HIV RNA nebo DNA, tato metoda je v současnosti pomocná a neměla by se používat pro screening infekce HIV . U lidí s diagnózou HIV infekce se používá kvantitativní metoda PCR pro HIV RNA, která nám umožňuje odpovědět na otázku, kolik viru je v krvi. Také by se neměl používat pro diagnostické účely.

Jaký je rozdíl mezi diagnostikou 3. a 4. generace:

3. generace detekuje pouze protilátky – odpověď těla na virus. Protilátky se objevují vždy s určitým zpožděním po infekci – tělo potřebuje čas na jejich produkci. Obvykle toto období trvá 3-6 týdnů po infekci – jedná se o tzv. „období okna“.

4. generace detekuje jak protilátky, tak antigen p24, fragment samotného viru HIV.

Test 4. generace vykazuje pozitivní výsledek, když je koncentrace viru dostatečná pro jeho detekci, ve většině případů k tomu dochází ještě před objevením se protilátek.

Je důležité si uvědomit, že diagnostika 4. generace odhalí HIV v akutním stadiu infekce – kdy je virus již v krvi a spermatu infikované osoby ve vysoké koncentraci, ale ještě nejsou žádné protilátky.

Pravděpodobnost pohlavního přenosu viru od osoby v akutní fázi infekce se odhaduje na 10krát vyšší než u osob s chronickou infekcí HIV. V tomto případě testování osoby v akutní fázi diagnostikou 3. generace bude mít negativní výsledek.

Pokud je detekován antigen p24 (virový protein)?

Pokud je detekován antigen p24 (virový protein), znamená to nedávnou infekci od dvou týdnů do 2 měsíců před provedením testu. Tento antigen p24 je obvykle detekován pouze v počátečním stadiu (akutní) infekce HIV, kdy v krvi nejsou žádné nebo málo IgM a IgG protilátky, poté mizí.

V současné době jsou vyvíjeny testovací systémy 24. generace ELISA (hypersenzitivní na protein p4), které jsou schopny detekovat HIV počínaje 10-12 dnem od okamžiku infekce, tzn. dříve než PCR.

Detekuje test 4. generace ELISA HIV-2?

Ano, všechny moderní specializované systémy ELISA detekují HIV-1 a HIV-2.

Jaké je časové období pro testování 4. generace?

Testovací systémy čtvrté generace jsou schopny detekovat nejen protilátky proti HIV, které tělo produkuje v reakci na infekci, ale také samotný HIV detekcí virového proteinu p4. Protein p24 lze detekovat velmi brzy, ale jeho hladina v krvi v období po infekci postupně klesá, ale současně s tímto poklesem se zvyšuje hladina protilátek. Všichni lidé jsou různí, takže není možné přesně určit 24% minimální období, kdy již není důvod o testu pochybovat. Dnes však existuje dostatečné množství studií, které nám dávají velmi konkrétní vodítka – laboratorní systémy ELISA 100. generace s velmi vysokou pravděpodobností infekci HIV „neminou“ do měsíce po nakažení.

Může se stát, že antigen je již navázán protilátkami, ale není dostatek protilátek pro test?

Antigen nikde nezmizí, protože virus se množí, je v krvi a také buňky, které zemřely na HIV, jsou zničeny a uvolňují do krve hodně antigenu, ale než došlo k sérokonverzi, tzn. když začne tvorba protilátek, veškerý antigen v krvi je ve vázané formě, tzn. ve formě komplexů antigen-protilátka. Testovací systém ELISA již nemůže detekovat takové imunitní komplexy, protože diagnostické protilátky ze soupravy testovacích činidel nemohou vázat antigen již navázaný v imunitním komplexu. Existují však studie, ve kterých jsou tyto imunitní komplexy izolovány z krve pro studium v ​​laboratořích. Proto říkají, že testovací systém 4. generace ELISA dokáže detekovat pouze ZDARMA antigen p24. Je volný na začátku infekce, kdy ještě nejsou žádné protilátky, a v tzv. terminálním stadiu, kdy se zvyšuje virová zátěž a imunitní systém oslabuje natolik, že se opět objeví antigen NESPOJENÝ s protilátkami, který může být diagnostikován.

Tento jev byl popsán, ale je to velmi krátkodobý jev, v podstatě je to průsečík dvou podmíněných křivek, nikdo vám neřekne, zda jsou to hodiny nebo desítky minut, ale rozhodně ne mnoho dní, spíše je třeba předpokládat maximálně (předpoklad, není dostatek údajů pro vyjádření) 1-2 dny. A v každém případě tento jev, pokud k němu dojde, je tam, kde obecně z opatrnosti nehovoříme o úplné spolehlivosti testování, tzn. během prvních 4-6 týdnů a s velmi vysokou mírou pravděpodobnosti je toto období v ještě kratším období – během prvních dvou týdnů, tzn. Je to, jako bychom skládali obě okna do sebe. Navíc zjevně existují některé podmínky, které činí pravděpodobnost „chytit“ toto druhé okno alespoň trochu významnou – počáteční stavy imunodeficience, například ty spojené s věkem.

Z jakého období tedy ELISA 4. generace zcela spolehlivě vylučuje HIV?

Test 4. generace může v některých případech odhalit infekci HIV již týden po nakažení, na to by se však nemělo spoléhat, jde spíše o výjimku. Měsíc je poměrně spolehlivé období pro moderní laboratorní testovací systémy.

Pokud se domníváte, že jste měli rizikový kontakt, proveďte test ELISA 6 týdnů po nebezpečném kontaktu – spolehlivost negativního výsledku se bude extrémně blížit 99,9 %. Mnoho odborníků považuje 6týdenní období pro ELISA 4. generace v laboratorních podmínkách za zcela dostatečné k vyloučení infekce HIV.

Může něco způsobit falešně negativní (-) výsledek testu HIV?

Falešně negativní výsledek, přesněji řečeno výrazné prodloužení „období okna“, může být teoreticky způsobeno antiretrovirovou terapií zahájenou velmi brzy po infekci, ale i některými závažnými onemocněními imunitního systému.

Alkohol, jiné psychoaktivní látky, jakékoli potraviny, doplňky stravy, imunostimulanty, imunomodulátory, antibiotika a jakékoli jiné léky, stres, únava, celková onemocnění a oslabená imunita, chřipka, angína a další onemocnění – to vše nemá zásadní vliv na riziko falešně negativního výsledku testu na HIV.

Může u některých onemocnění existovat falešně pozitivní výsledek (+) na HIV?

Ano, taková možnost vždy existuje. Jsou stavy (např. těhotenství) nebo onemocnění (řada autoimunitních onemocnění, onemocnění jater a další), kdy pravděpodobnost falešně pozitivního výsledku také poněkud zvyšuje nedávné očkování některými imunopreparáty.

HIV-2 je detekován později metodou ELISA, je to pravda?

V tomto případě je to jedno, protilátky dosáhnou hladiny dostatečné pro detekci přibližně ve stejném časovém horizontu, obecná doba zajištění 6-8 týdnů od nebezpečného kontaktu „pokrývá“ obě situace s HIV-1 i HIV-2.

Pokud je test ELISA pozitivní, znamená to diagnózu infekce HIV?

Ne, je vyžadováno potvrzení jiným způsobem. Potvrzující metodou pro diagnostiku infekce HIV je dnes nepřímá imunofluorescence (IIFA, immunoblot, Western blot). Imunoblot vykazuje vysokou senzitivitu (99,3-99,7 %) a specificitu (99,7 %), ale protože metoda stanovuje imunoglobuliny třídy G, může být výsledek falešně negativní po dobu až tří týdnů od okamžiku infekce.

Lze HIV RNA nebo DNA PCR použít pro screening HIV?

Ano, můžete. Ne, nedoporučuje se. Přestože se metoda za poslední desetiletí výrazně zlevnila a zpřesnila, stále je drahá, časově náročná a technicky složitá, což znamená vysoké riziko chyb. V Rusku, stejně jako v USA, se kvantitativní PCR metoda pro screening a diagnostiku HIV infekce v rutinních případech nedoporučuje.

Co se týče PCR – PCR je stále schopna detekovat virus dříve než všechny ostatní metody, dokáže najít doslova jehlu v kupce sena, protože Metoda je schopna identifikovat několik desítek MOLEKUL virové RNA nebo DNA v mililitru krve. ELISA pro antigen je schopna vykázat pozitivní signál pouze od několika desítek milionů molekul antigenu p24 na mililitr, ale je třeba poznamenat, že počet molekul p24 se po infekci rychle zvyšuje na takové hodnoty, a přesto PCR vždy funguje o něco dříve.

Jaký je rozdíl mezi DNA PCR a HIV RNA PCR?

RNA se běžně používá v kvantitativních testech k odhadu virové zátěže u diagnostikovaných jedinců, například k posouzení účinnosti terapie. DNA – v mononukleárních buňkách, například pro diagnostiku u dětí, kde protilátky matek proti HIV interferují s použitím metody ELISA. Oba testy mohou být jak kvantitativní, tak kvalitativní. Oba mohou být v úzkých případech použity jako diagnostika s přihlédnutím ke specifickým omezením daným technickými parametry systému.

Jaká metoda diagnostiky HIV se používá v laboratoři Andro-Med Medical Center?

Laboratoř Andro-Med Medical Center využívá k diagnostice HIV metodu ELISA a testy 4. generace. Krevní testování na HIV se provádí pomocí certifikovaného standardizovaného enzymového imunotestovacího systému “MilaLab-IFA-HIV-AGAT” k detekci protilátek proti virům lidské imunodeficience typu 1 a 2 (HIV-1 a HIV-2) a antigen p24« , schválený pro použití na území Ruské federace, podle Sanitárních a epidemiologických pravidel SP 3.1.5.2826-10 „Prevence infekce HIV“ ze dne 11.01.2011.

Účast laboratoře MC “Andro-Med” na externím hodnocení kvality v sekci “HIV infekce”.

Standardním prvkem činnosti laboratoře je průběžná účast na externím hodnocení kvality výzkumu, které provádí Federální systém pro externí hodnocení kvality klinického laboratorního výzkumu (FSEVAR), vytvořený a fungující v souladu s objednávkami hl. ruské ministerstvo zdravotnictví. Tato účast je definována národními normami a předpisy mnoha zemí světa.

Sekce FSVOK, na kterých se laboratoř MC podílí, pokrývají maximální počet typů výzkumu, včetně sekce „HIV infekce“, která je jednou z nejdůležitějších součástí zajištění správnosti výzkumu a tím i efektivity výzkumu. klinické laboratorní diagnostiky.

Laboratoř MC “Andro-Med” má osvědčení o účasti ve Federálním systému externího hodnocení kvality laboratorního a klinického výzkumu.

Buďte zdraví!! Postarejte se o sebe, své blízké a blízké.