Femoflor analýza – co to je a jak se bere?

Femoflor 16 je studie vaginální biocenózy u žen metodou PCR Real time, která kvantitativně zjišťuje složení poševní mikroflóry.

Metoda umožňuje kvantitativní stanovení složení vaginální mikroflóry:

• fakultativně anaerobní mikroorganismy: Lactobacillus spp., Enterobacterium spp., Streptococcus spp., Staphylococcus spp.;
• obligátní anaerobní mikroorganismy: Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/Porphyromonas spp., Eubacterium spp., Sneathia spp./Leptotrichia spp./Fusobacterium spp., Megasphaera spp./Veilonella spp./Cbacterium spp.stridium/Dialister spp. Mobiluncus spp./Corynebacterium spp., Peptostreptococcus spp., Atopobium vaginae;
• mykoplazmata: Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp.; Mycoplasma genitalium (patogen, určeno kvalitativně),
• Houby: Candida spp.

Studie je indikována v přítomnosti vaginálního výtoku, stížností na bolest v dolní části břicha, nepohodlí během sexu. Na rozdíl od studií Femoflor-8 se více zkoumá oportunní flóra, která neustále žije ve vagíně a za určitých podmínek, jako je užívání antibiotik nebo změna sexuálních partnerů, může způsobit zánět.

Pokud došlo k nechráněnému sexuálnímu kontaktu, „pochybnému“ kontaktu a existuje riziko přenosu infekcí, můžete doplnit testy:

• Neisseria gonorrhoeae, detekce DNA
• Chlamydia trachomatis, detekce DNA
• Trichomonas vaginalis, detekce DNA
• Herpes simplex virus 1,2, detekce DNA
• Cytomegalovirus, detekce DNA
• Lidský papilomavirus typ 16, 18, stanovení DNA
• Lidský papilomavirus typ 6, 11, stanovení DNA

Výzkumná metoda – Real time PCR

Materiál pro výzkum – Vaginální seškrab

Doba provádění

Analýza bude připravena do 3 dnů, kromě soboty, neděle a dne odběru. Lhůtu lze v případě potřeby prodloužit o 1 den. Výsledky obdržíte emailem. e-mail ihned, když je připraven.

Doba realizace: do 3 dnů, kromě soboty, neděle a dne odběru, kromě soboty a neděle (kromě dne odběru biomateriálu)

Jak se připravit

V předstihu

• Stěry pro testování se odebírají v ordinaci gynekologa ženám během nepřítomnosti krvavého výtoku (menstruace) a nedoporučují se 5 dní před očekávaným začátkem menstruace

• Diskutujte se svým lékařem o užívání antibakteriálních léků a léků obsahujících mikroorganismy, protože to může vést k falešně negativním a falešně pozitivním výsledkům testů stěru
• Sběr urogenitálních stěrů se doporučuje nejdříve 2 týdny po ukončení léčby
• Nemějte pohlavní styk po dobu 72 hodin před odběrem urogenitálních stěrů
• 48 hodin před odběrem urogenitálních stěrů nepoužívejte lokální chlór obsahující a antibakteriální léky, pro ženy: neprovádějte kolposkopii a transvaginální ultrazvuk

V den doručení

• v den testu stěru neprovádějte procedury genitální hygieny, ženám se nedoporučuje používat vaginální výplachy, tampony a vlhčené ubrousky
• Při odběru stěru z močové trubice se 2 hodiny před analýzou zdržte návštěvy toalety

• Postup pro odběr urogenitálního stěru u žen. K odběru stěru sedí žena na gynekologickém křesle, zdravotník prohlédne genitální trakt, zavede do pochvy zrcátko – sterilní nástroj, odstraní hlen

• poté je na doporučení ošetřujícího lékaře použit sondou odběr materiálu z pochvy;

Výsledek

opis

Interpretace výsledků testů má informativní charakter, není diagnózou a nenahrazuje rady lékaře. Referenční hodnoty se mohou lišit od uvedených v závislosti na použitém zařízení, skutečné hodnoty budou uvedeny ve výsledkovém listu.

Kvantitativní hodnocení vaginální mikroflóry se provádí v absolutním i relativním vyjádření. Absolutní indikátor: množství DNA požadovaného mikroorganismu ve vzorku se obvykle vyjadřuje v ekvivalentech genomu (GE), což je úměrné množství mikroorganismu. GE odpovídá počtu kopií DNA požadovaného mikroorganismu ve vzorku množství DNA požadovaného mikroorganismu lze také vyjádřit jako dekadický logaritmus – Lg (GE/vzorek). Například množství Lactobacillus spp. ve vzorku = 10 GE/vzorek, nebo jako Lg (GE/vzorek) = 7. Absolutní ukazatel v závislosti na technice odběru biomateriálu a způsobu extrakce DNA. Různé techniky odběru vzorků mohou vést k tomu, že do zkumavky vstoupí různá množství biomateriálu, což ovlivňuje kvantitativní ukazatele.

Relativní kvantitativní ukazatel mikroorganismu se vypočítá jako poměr množství požadovaného mikroorganismu k množství celkové bakteriální hmoty (TBM). Relativní ukazatele jsou přesnější a objektivnější, protože jsou výrazně méně ovlivněny chybami jak klinických lékařů při získávání biomateriálu, tak i klinických laboratorních diagnostických lékařů při provádění analýzy. Relativní množství mikroorganismů může být prezentováno ve dvou formátech: rozdíl mezi desetinnými logaritmy množství odpovídající skupiny mikroorganismů a TBM a jako procento ve vztahu k TBM.

Interpretace výsledků studie:

Fáze I. Hodnocení odběru biomateriálu a celkové bakteriální hmoty.

Etapa II. Hodnocení normální vaginální flóry.

• Relativní množství Lactobacillus spp., nad -0,1 lg (> 80 %): normocenóza.
• Relativní množství Lactobacillus spp., od -0,7 do -0,1 lg (20-80 %): středně závažná dysbióza.
• Relativní množství Lactobacillus spp., pod -0,7 ( < 20 %): výrazná dysbióza.

Stupeň III. Hodnocení kvantitativního poměru oportunních fakultativně anaerobních a obligátních anaerobních mikroorganismů.

• Provádí se v případech středně těžké nebo těžké vaginální dysbiózy.
• Relativní počet mikroorganismů nižší než -2,0 lg (
• Relativní množství mikroorganismu od -2,0 do -1,0 lg (1-10 %): mírně zvýšená hladina.
• Relativní počet mikroorganismů větší než -1,0 (> 10 %): významně zvýšená hladina.

Etapa IV. Hodnocení přítomnosti Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp. a houby rodu Candida.

Kvantitativní hodnocení Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp., Candida spp. se provádějí pouze podle absolutních ukazatelů. Diagnostický práh pro Ureaplasma spp. a Mycoplasma hominis je absolutní hodnota 10 GE/vzorek [Lg (GE/vzorek) = 5]. Pro houby Candida je absolutní hodnota 5,0 GE/vzorek [Lg (GE/vzorek) = 10].

Mycoplasma genitalium v ​​tomto testovacím systému je stanovena kvalitativní metodou. Mycoplasma genitalium je absolutní patogen a jeho průkaz svědčí pro urogenitální mykoplazmózu.

Jednotka měření: absolutní a relativní kvantitativní ukazatele
mikroflóra

Referenční hodnoty: žádné

Гарантия качества

Studii provádí Detecting Amplifier DT-96 „DNA Technologies“, Rusko

Multifunkční vysokorychlostní zesilovač v reálném čase s automatickým generováním závěrů.

Femoflor 16 vaginální stěr

Femoflor 16 – studium vaginální biocenózy u žen metodou PCR Real time (PCR v reálném čase), metoda umožňuje kvantitativní stanovení složení vaginální mikroflóry:

• fakultativně anaerobní mikroorganismy: Lactobacillus spp., Enterobacterium spp., Streptococcus spp., Staphylococcus spp.;
• obligátní anaerobní mikroorganismy: Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/Porphyromonas spp., Eubacterium spp., Sneathia spp./Leptotrichia spp./Fusobacterium spp., Megasphaera spp./Veilonella spp./Cbacterium spp.stridium/Dialister spp. Mobiluncus spp./Corynebacterium spp., Peptostreptococcus spp., Atopobium vaginae;
• mykoplazmata: Mycoplasma hominis/Mycoplasma genitalium, Ureaplasma spp.;
• Houby: Candida spp.

Kromě toho se na základě výzkumných dat provádí posouzení studované biocenózy jako celku a stanoví se etiologie infekčního procesu.

Podle četných studií domácích i zahraničních autorů je ženská pochva kolonizována mikroflórou, jejíž složení se mění v závislosti na mnoha exogenních i endogenních faktorech. Ve vaginální mikroflóře žen se kromě Lactobacillus spp. (patří do normoflóry, jejich podíl na normě je více než 80 %), lze prokázat fakultativně anaerobní mikroorganismy: Enterobacterium spp. (jsou součástí normální flóry, mohou být etiologickou příčinou vaginitidy), Streptococcus spp. (může způsobit bakteriální vaginózu), Staphylococcus spp. (jsou součástí normální flóry a mohou být etiologickou příčinou vaginitidy); obligátní anaerobní mikroorganismy: Gardnerella vaginalis (zástupce přechodné mikroflóry, jeden z etiologických agens bakteriální vaginózy), Prevotella bivia (nachází se v urogenitálním a střevním traktu, může způsobit rozvoj bakteriální vaginózy), Porphyromonas spp. (jsou součástí normální mikroflóry urogenitálního traktu a dutiny ústní, mohou způsobit bakteriální vaginózu), Eubacterium spp. (jeden z hlavních obyvatel střeva, oportunní mikroorganismy, může způsobit rozvoj bakteriální vaginózy), Sneathia spp. (podílí se na tvorbě bakteriální vaginózy), Leptotrichia spp. (spojené s rozvojem bakteriální vaginózy), Fusobacterium spp. (oportunní mikroorganismy, které se mohou podílet na rozvoji bakteriální vaginózy), Megasphaera spp. (spojené s rozvojem bakteriální vaginózy), Veilonella spp. (oportunní mikroorganismy, které se mohou podílet na rozvoji bakteriální vaginózy), Dialister spp. (oportunní mikroorganismy, které se mohou podílet na rozvoji bakteriální vaginózy), Lachnobacterium spp. (spojené s rozvojem bakteriální vaginózy), Clostridium spp. (normální obyvatelé střeva, oportunní mikroorganismy, mohou se podílet na vzniku bakteriální vaginózy), Mobiluncus spp. (oportunní mikroorganismy, které se podílejí na vzniku bakteriální vaginózy), Corynebacterium spp. (oportunní mikroorganismy, které mohou způsobit infekce urogenitálního traktu), Peptostreptococcus spp. (oportunní mikroorganismy, které se mohou podílet na vzniku bakteriální vaginózy), Atopobium vaginae (má etiologický význam při vzniku bakteriální vaginózy); mykoplazmata: Mycoplasma hominis (oportunní patogen), Ureaplasma spp. (oportunní patogen); Houby: Candida spp. (oportunní houby).

Vaginální dysbióza u žen je porušením kvantitativních a kvalitativních vztahů rezidentních mikroorganismů: saprofytických a oportunních, normálně obývajících vagínu. Rozvoj vaginální dysbiózy může být doprovázen metabolickými a imunitními poruchami a v některých případech klinickými projevy, jejichž závažnost se může lišit od asymptomatického nosičství až po výrazné klinické projevy. Ve světle takové úvahy o konceptu vaginální dysbiózy mohou být onemocnění, jako je bakteriální vaginóza, urogenitální kandidóza a onemocnění spojená s mykoplazmaty, konkrétními projevy dysbiózy obecně.

Četné studie prokázaly, že etiologická struktura urogenitálních infekcí způsobených oportunní mikroflórou je obvykle reprezentována asociací několika mikroorganismů. Klinický obraz je zase charakterizován latentním, nízkopříznakovým průběhem, absencí specifických klinických příznaků, sklonem k chronicitě a multifokální infekci, což nevyhnutelně vede k pozdní léčbě, často již ve stadiu rozvoje komplikací z reprodukční systém.

V současné době se ke stanovení diagnózy onemocnění urogenitálního traktu používají tradiční metody klinické laboratorní diagnostiky: mikroskopie nativních a metylenovou modří a Gramově barvených preparátů urogenitálního výtoku, kultivační mikrobiologické vyšetření urogenitálního výtoku a PCR testování (stanovení DNA patogenu v klinické praxi materiál). Mikroskopie nátěrů urogenitálních sekretů obarvených Gramem nám umožňuje identifikovat následující: počet a typ epiteliálních buněk, počet leukocytů a erytrocytů, přítomnost fagocytózy, složení a relativní kvantitativní charakteristiky mikroflóry. Světelnou mikroskopií přitom nelze detekovat mnoho typů etiologicky významných a oportunních patogenů, např. Atopobium vaginae, Mycoplasma hominis aj.

Mikrobiologické testování je „zlatým standardem“ laboratorní diagnostiky, protože umožňuje identifikovat mikroorganismus až na úrovni druhu a určit citlivost izolovaného kmene na léky. Tato metoda však není bez řady nedostatků, neboť oportunní mikroflóru představují především obligátní anaerobní a fakultativně anaerobní mikroorganismy, jejichž kultivace vyžaduje kvalitní selektivní živná média, specializované laboratoře vybavené nezbytným laboratorním vybavením pro pěstování anaerobů, speciální školení personálu zdravotnických laboratoří.

Metoda PCR s detekcí výsledku na konci reakce (v koncovém bodě) bez kvantitativního stanovení infekčního agens umožňuje rychlou a efektivní identifikaci požadovaného patogenního nebo oportunního mikroorganismu, obcházení fáze kultivace a izolace čistá kultura. Identifikace oportunních mikroorganismů bez zohlednění počtu konkrétního mikroorganismu a kvantitativního a kvalitativního složení mikroflóry však neumožňuje určit etiologický význam zjištěných oportunních mikroorganismů v rozvoji infekčního a zánětlivého procesu v konkrétního pacienta.

Řešením problému kvantitativního hodnocení širokého spektra oportunních mikroorganismů, včetně těch obtížně kultivovatelných a nekultivovaných mikrobiologickými metodami, je použití testovacího systému Femoflor-16, založeného na metodě PCR Real time, výrobce NPO DNA -Technology LLC, Rusko. Metoda je založena na komplexním kvantitativním hodnocení vaginální mikroflóry se srovnávací analýzou konkrétních zástupců normální flóry a oportunní mikroflóry s celkovým počtem mikroorganismů s cílem identifikovat nerovnováhu, stupeň její závažnosti a určit etiologickou roli. specifických oportunních mikroorganismů při jeho vývoji.

Pro interpretaci dat získaných během studie biomateriálu pomocí reagenčních souprav řady FEMOFLOR doporučuje vývojář a výrobce spoléhat se na následující informace:

KVM – řízení odběru materiálu. Nezbytnou podmínkou pro kvalitní PCR studii je správný odběr biomateriálu. Ukazatelem dostatečnosti získaného vzorku je dostatečné množství lidské DNA, která se při reakci izoluje z buněk vystýlajících sliznici a při správném odběru stěru se dostane do vzorku. Hodnota KVM nižší než 10^4 ukazuje na nespolehlivé výsledky PCR v takových případech se doporučuje opakovaný odběr biomateriálu.

TBM (celková bakteriální hmota) – celkový počet bakterií přítomných v testovaném vzorku. Pokles BMP pod prahové hodnoty ukazuje na nedostatečnou kolonizaci tohoto lokusu bakteriemi, a to i v důsledku antibiotické terapie nebo hormonálních poruch.

Normální flóra – Lactobacillus spp. — jejich absolutní množství se normálně prakticky neliší od celkové bakteriální hmoty, protože laktobacily jsou její hlavní složkou. Relativní index laktobacilů se vypočítá automaticky výpočtem rozdílu v dekadických logaritmech mezi absolutní hodnotou laktobacilů a TBM (například pro absolutní TBM 10^7 bude dekadický logaritmus 7). Pokles relativního indexu laktobacilů odráží nerovnováhu v urogenitální mikroflóře.

Hodnocení oportunní flóry. Posuzuje se také počet aerobních a anaerobních bakterií v absolutním i relativním vyjádření. Relativní ukazatel se vypočítá jako rozdíl mezi desetinnými logaritmy mikroorganismu nebo jejich skupiny a TBM. Podle úrovně relativní velikosti se určují mírná, mírná a významná zvýšení.

Hodnocení mykoplazmat a hub Candida provádí se pouze podle absolutního ukazatele při překročení určitého prahu (10^3 pro Candidu, 10^4 pro mykoplazma), přístroj zaznamená pozitivní výsledek;

Relativní hodnoty jsou vyjádřeny v % a představují podíl každého identifikovaného mikroorganismu na celkovém počtu bakterií. Hodnoty jsou uvedeny jako rozsahy zohledňující chybu metody. PCR pro každý mikroorganismus se provádí nezávisle, včetně indikátoru TBM (celková bakteriální hmota), proto se součet relativních hodnot nemusí nutně rovnat 100 %;

Příslušenstvím pro sérii studií FEMOFLOR ve variantách Femoflor 8 a Femoflor 16 je uzavřený systém skládající se z reagenčních souprav, detekčního zesilovače a specializovaného softwaru. Všechny detekční a kvantifikační algoritmy, stejně jako automatické generování závěru, jsou chráněny autorským právem vývojáře a nejsou sdělovány koncovému uživateli. Reagenční soupravy a vybavení spolu se softwarovým produktem mají registrační certifikáty od Roszdravnadzor, které povolují jejich použití pro lékařské účely.

Analýza bude připravena do 3 dnů, kromě soboty, neděle a dne odběru. Lhůtu lze v případě potřeby prodloužit o 1 den. Výsledky obdržíte emailem. e-mail ihned, když je připraven.